技术分享:一个集合Vika、Flp、Dre和Cre重组系统的报告基因小鼠模型

发布网友 发布时间:2024-10-24 02:54

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热心网友 时间:2024-11-01 18:57

技术报告:集成Vika、Flp、Dre和Cre的重组系统小鼠模型构建

作者:王小胖

在基因工程领域,多种位点特异性重组酶(SSR)系统如Cre-loxP、Flp-FRT、Dre-rox和Vika-vox被广泛应用。近期,一项研究在《科学报告》中介绍了一种创新模型——MuX(multi-reporter mouse line for loci-of-recombination (X))小鼠,它集合了Cre-loxP、Vika-vox、Dre-rox和Flp-FRT四个系统于一身的报告基因表达系统[10]。研究团队在小鼠胚胎干细胞(mESC)上进行了系统效率和特异性的交叉测试,证实了这些重组酶在基因改造方面的高效与精确性,且彼此之间表现出良好的系统特异性,Flpo-FRT的变体Flpo在37℃的耐热性使其在动物体内表现优秀[10]。

MuX小鼠的设计使得实验者无需分别构建针对每种重组酶的报告基因小鼠,简化了实验流程,减少了动物资源的使用。通过将MuX载体整合到Rosa26安全位点,成功实现了mESC的打靶和测试,E10.5天和成年子代的多组织EGFP表达验证了其在体内的重组效果[10]。这种模型对于条件诱变和细胞命运追踪研究具有重要意义,因为它允许在长链非编码RNA或高同源性基因上进行特异性操作,并能揭示不同组织中的新型细胞群体[1, 2]。

GTP研发中心利用自主研发的“人造精子细胞”技术,能够快速构建基因改造小鼠,通过单倍体打靶实现高效、定制化的基因操作,如基因敲入、敲除和人源化改造,这进一步提升了研究的效率和便利性[具体网址与联系方式见文末]。MuX小鼠模型的出现,无疑为基因组工程研究提供了强大工具,有助于挖掘更多生物医学应用的可能性[10]。

参考资料:

1. Chakravarti D, ...

2. Bouabe H, ...

...[10] Karimova M, ...

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